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　　當(dāng)MassWorks在您的氣質(zhì)或液質(zhì)上的首次使用時(shí)，強(qiáng)烈推薦先進(jìn)行簡(jiǎn)單，容易控制的實(shí)驗(yàn)，隨后再進(jìn)行更復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)。首先進(jìn)行簡(jiǎn)單的連續(xù)注射進(jìn)樣實(shí)驗(yàn)，它能簡(jiǎn)單快速方便地展示MassWorks給您的儀器帶來(lái)更廣泛的用途。

液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)流動(dòng)注射進(jìn)樣實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

　　將一個(gè)純的待測(cè)化合物與一或二個(gè)校正標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)混合，為了得到好的質(zhì)譜信噪比，建議待測(cè)物和校正物的濃度為10-20µM，并根據(jù)化合物性質(zhì)和儀器條件調(diào)整濃度，終待測(cè)化合物和校正標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)譜響應(yīng)，經(jīng)過(guò)必要的平滑處理后，希望的信噪比為100: 1或更高。標(biāo)準(zhǔn)校正離子與待測(cè)分析物質(zhì)量數(shù)差值不超過(guò)50 Da，兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)校正離子的質(zhì)量數(shù)包夾待測(cè)分析物是比較理想的，而且校正離子和待測(cè)分析物不能有任何干擾。如果發(fā)送數(shù)據(jù)給Cerno是為了評(píng)價(jià)性能，您需要提供標(biāo)準(zhǔn)校正離子的元素組成。

氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)的外標(biāo)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

　　當(dāng)一個(gè)類似流動(dòng)注射的進(jìn)樣到氣質(zhì)系統(tǒng)時(shí)，使用標(biāo)準(zhǔn)校正樣品做為外標(biāo)注入系統(tǒng)是容易的。一些氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)有內(nèi)置的校正標(biāo)樣，能很容易地能引入質(zhì)譜系統(tǒng)去校正。通常使用全氟三丁胺，它提供了非常有用的質(zhì)量校正范圍，EI源為50-500 Da，CI源為200-700 Da。

　　根據(jù)下面的“數(shù)據(jù)采集”，首先運(yùn)行校正標(biāo)樣，通常需要測(cè)定1-2min。將系統(tǒng)中的校正標(biāo)樣沖洗完后，立即利用正常GC方法運(yùn)行分析物。

數(shù)據(jù)采集

　　重要的是，數(shù)據(jù)必須在輪廓模式(有時(shí)也叫連續(xù)模式)下采集。

質(zhì)心數(shù)據(jù)不適用于MassWorks校正!

　　0.5 Da的四極桿質(zhì)譜采樣間隔多為0.1 Da，任何過(guò)濾參數(shù)應(yīng)該被設(shè)定在低值，以保證小的數(shù)據(jù)過(guò)濾。

　　連續(xù)注射進(jìn)樣，調(diào)整離子化條件得到穩(wěn)定的采集信號(hào)，然后至少采集1-2min的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，允許采集多次掃描數(shù)據(jù)(100或更多)，然后，用MassWorks分析。數(shù)據(jù)采集完成，檢查分析物或標(biāo)準(zhǔn)物的數(shù)據(jù)信號(hào)，是否有檢測(cè)器飽和現(xiàn)象，這能夠很容易地通過(guò)觀察M和M+1峰的比例來(lái)識(shí)別，如果M+1峰的相對(duì)豐度比理論值更大，檢測(cè)器信號(hào)很可能飽和。另外，平坦的峰高或在單個(gè)同位素上倒峰的出現(xiàn)都是檢測(cè)器飽和的信號(hào)。

如果檢測(cè)器信號(hào)是飽和，將不會(huì)得到好的分析結(jié)果!

　　必要時(shí)，應(yīng)稀釋樣品重復(fù)測(cè)試，直到?jīng)]有檢測(cè)器信號(hào)飽和現(xiàn)象出現(xiàn)。為預(yù)防飽和現(xiàn)象出現(xiàn)，推薦通過(guò)稀釋樣品，連續(xù)進(jìn)樣不同濃度的樣品進(jìn)行測(cè)試，Cerno檢測(cè)使用具有好的信噪比的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

關(guān)于離子阱的注意事項(xiàng)

　　不像四極桿和TOF儀器，在某些離子阱儀器上得到高質(zhì)量準(zhǔn)確度是有一定局限性的。由于空間電荷效應(yīng)，盡管經(jīng)過(guò)MassWorks校正，傳統(tǒng)的離子阱質(zhì)譜得到的質(zhì)量準(zhǔn)確度大約為30-80 mDa。例如，Thermo的離子阱質(zhì)譜，質(zhì)量準(zhǔn)確度是阱的幾何形狀、阱中的離子濃度和化學(xué)組成的函數(shù)，大容量新阱的設(shè)計(jì)在一定程度上降低了這些因素的影響，但得到高質(zhì)量準(zhǔn)確度的能力仍比典型的四極桿設(shè)計(jì)低10倍。具有較大內(nèi)部容量的線性離子阱，ABI/Sciex Q TRAP的空間電荷效應(yīng)被很好的控制，可得到小于10-20 mDa的質(zhì)量誤差。另一個(gè)控制離子阱內(nèi)在質(zhì)量誤差的方法，避免利用連續(xù)注射進(jìn)樣方式將全部離子同時(shí)捕獲在阱內(nèi)，而是利用良好的LC分離，使不同離子在不同時(shí)間分別被捕獲在阱內(nèi)。

　　盡管由于空間電荷效應(yīng)的限制，Cerno研究發(fā)現(xiàn)，很多情況下經(jīng)過(guò)MassWorks校正后，未知物的元素組成仍然可以得到，盡管質(zhì)量準(zhǔn)確度不高，這是通過(guò)校正的線形譜圖去匹配未知物的同位素輪廓圖來(lái)實(shí)現(xiàn)的，校正的線形譜圖提供了的同位素輪廓，同位素輪廓是化合物的特性，不同化合物有不同的同位素輪廓，Cerno稱這種方式為CLIPS(校正的線形譜圖搜索)，它克服了質(zhì)量準(zhǔn)確度的局限性。當(dāng)然，它也可以在已經(jīng)得到了高的質(zhì)量準(zhǔn)確度時(shí)，通過(guò)元素組成，更好的實(shí)現(xiàn)未知物的識(shí)別。例如，可以幫助Q-TOF或其它高分辯質(zhì)譜實(shí)現(xiàn)的化合物確認(rèn)。

發(fā)送數(shù)據(jù)用于MassWorks評(píng)價(jià)

　　一旦質(zhì)譜數(shù)據(jù)被得到，請(qǐng)聯(lián)系綠綿公司或Cerno。由于文件比較大，通常需要利用FTP發(fā)送， 然而有些單位可能屏蔽了FTP發(fā)送，如果文件不是很大，可以通過(guò)郵件附件的方式發(fā)送。對(duì)于某些儀器(Agilent和Waters)，需要發(fā)送整個(gè)文件夾;對(duì)于ABI/Sciex儀器，僅僅需要發(fā)送*.wiff文件和*.wiff.scan文件(如果存在);Thermo儀器，僅需要發(fā)送*.raw文件。如果是利用外標(biāo)法進(jìn)行的GC實(shí)驗(yàn)，要確保發(fā)送了校正物和分析物的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。簡(jiǎn)單的方式是將多個(gè)文件壓縮到一個(gè)壓縮文件中，這可以在Windows XP中實(shí)現(xiàn)，選擇文件或文件夾，點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵，選擇“發(fā)送到壓縮文件夾”，將得到的*.zip文件加到郵件附件或通過(guò)FTP發(fā)

　　送給Cerno或綠綿公司。

　　在提供原始數(shù)據(jù)的同時(shí)，也應(yīng)該提供以下信息：

　　· 標(biāo)準(zhǔn)校正離子的元素組成

　　· 想得到未知物的質(zhì)量準(zhǔn)確數(shù)還是元素組成

　　· 儀器型號(hào)和運(yùn)行模式

　　· 您的聯(lián)系方式

　　首次使用MassWorks推薦實(shí)驗(yàn)條件(下載)