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糧食作物的真菌霉菌產(chǎn)生了有毒代謝產(chǎn)物就是霉菌毒素，法規(guī)和立法部門建立測(cè)試霉菌毒素污染物方法，適于測(cè)試普遍存在的各種糧食作物的霉菌毒素。本文介紹了LC-MS/MS分析糧食作物的真菌毒素的佳前處理SPE固相萃取方法。

該應(yīng)用方法所有相關(guān)的霉菌毒素，在不同谷物基質(zhì)中從% RSD到LOQs低定量限，都可以得到高回收率，并且符合歐洲糧食作物霉菌毒素法規(guī)分析要求。

ISOLUTE® Myco固相萃取柱提供了皮實(shí)、可靠的大部分食品多霉菌毒素類的樣品制備方法。使用一個(gè)單一的，易于使用的樣品制備產(chǎn)品，加上優(yōu)化的基質(zhì)特定應(yīng)用于說明，科學(xué)家可以制備不同的食品/作物樣品，再進(jìn)行LCMSMS分析。

分析目標(biāo)物：
黃曲霉毒素B1（AB1），黃曲霉毒素B2（AB2），黃曲霉毒素G1（AG1），黃曲霉毒素G2，麥角隱亭（ECO）、麥角考寧（ECY），赭曲霉毒素A（OTA）、伏馬菌素B1（FB1），玉米赤霉烯酮（ZON），T-2毒素，HT-2毒素

樣品制備步驟
選擇柱子：ISOLUTE Myco 60mg/ 3mL柱（Tabless）貨號(hào)：150-0006-BG
樣品預(yù)處理：1. 樣品處理：研磨樣品（小麥好或玉米或大麥，50g），室溫下密封容器存放。
2.萃取：20mL50%乙腈（aq）與研磨好的5g全谷物（或面粉）混合，振動(dòng)臺(tái)上30分鐘，將提取液轉(zhuǎn)移到50毫升的離心機(jī)管，離心機(jī)3000g（轉(zhuǎn)速）10分鐘
3.稀釋：取上清液8mL轉(zhuǎn)移到新的50mL離心管，并用32mL水稀釋，離心機(jī)3000g離心稀釋后提取物10分鐘。

固相萃取
全程流速是1mL/min
活化：2mL已經(jīng)活化柱子
平衡：2mL水平衡柱子
上樣：裝載3mL預(yù)處理的樣品，流速大1mL/min，建議重力載樣
干擾物清洗1：3mL水清洗柱子
干擾物清洗2：3mL10%乙腈清洗柱子
干燥：大真空干燥柱子30秒
洗脫1 ：2mL0.1% 甲酸乙腈溶液洗脫
洗脫2：2mL甲醇洗脫
后洗脫：合并洗脫液，使用SPE Dry（35 °C, 20-40 L/min)的空氣或氮?dú)饬鞲稍锘騎urboVap LV (15 bar，35 °C ，40分鐘）
用0.1%醋酸于20%乙腈：甲醇（1mL，1：1，v/v）進(jìn)行稀釋。分析之前使用0.2µm聚四氟乙烯膜注射器過濾器過濾。
液相色譜：Shimadzu Nexera UHPLC，色譜柱：Kinetex XB-C18 50 x 2.1 mm 2.6 µm dp (Phenomenex, Macclesfield UK)
液質(zhì)儀器：AB Sciex ，5500三重四極桿液質(zhì)，離子源：Turbo-V ESI

訂貨信息
貨號(hào)：150-0006-BG ISOLUTE Myco 60 mg/3 mL柱（(Tabless），數(shù)量：50個(gè)
貨號(hào)：121-1016 VacMaster-10樣品處理歧管整套帶有16mm收集架子 ，數(shù)量：1個(gè)
貨號(hào)：121-2016 VacMaster-20樣品處理歧管整套帶有16mm收集架子 ，數(shù)量：1個(gè)
貨號(hào)：C103198 TurboVap LV, 110V 數(shù)量 ： 1個(gè)
貨號(hào)：C103199 TurboVap LV, 220V 數(shù)量 ： 1個(gè)

來源于：Application Note AN782 ©Biotage （谷物中多種霉菌毒素萃?。〦xtraction of Multiple Mycotoxins From Grain Using ISOLUTE® Myco prior to LC-MS/MS Analysis

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