13種羰基衍生物HPLC方法
在工業(yè)空氣監(jiān)測中，測定羰基（醛和酮）排放量對(duì)預(yù)防呼吸、肺病、自身免疫疾病和癌癥起到至關(guān)重要。 根據(jù)DIN ISO 16000-3中描述的分析方法，羰基必須用2,4-二硝基苯肼（DNPH）轉(zhuǎn)化為其相應(yīng)的腙，以便通過UV檢測器檢測并通過反相HPLC分析。
Knauer諾爾液相解決方案
KNAUER AZURA HPLC plus 二元高壓梯度液相色譜系統(tǒng)，結(jié)合KNUAER自主的Eurospher II 100-3 DNPH色譜柱 ，參考DIN ISO 16000-3方法開發(fā)了一套完整的空氣中醛酮化合物的HPLC分析解決方案，可準(zhǔn)確地對(duì)13種醛酮化合物進(jìn)行定性定量分析。
AZURA HPLC plus 和 Eurospher II 100-3 DNPH色譜柱
3D立方體選項(xiàng)的色譜建模軟件
優(yōu)化HPLC中方法主要目的是為皮實(shí)、、可重復(fù)、合適的分析條件。為了節(jié)省資源，計(jì)算機(jī)輔助開發(fā)方法是有價(jià)值的工具。為了表征空氣樣品中的羰基含量，通常使用13種醛和酮DNPH衍生物的標(biāo)準(zhǔn)混合物。為了分析，必須實(shí)現(xiàn)所有13個(gè)組件的良好分離。在這里，使用具有3D立方體選項(xiàng)的色譜建模軟件來優(yōu)化碳?；鶚?biāo)準(zhǔn)混合物的分析。對(duì)梯度時(shí)間、溫度、三元洗脫液組成的影響進(jìn)行優(yōu)化，此外，在計(jì)算機(jī)上研究了方法的可靠性，并通過實(shí)驗(yàn)得到了高度一致的驗(yàn)證。
13種羰基的色譜圖，用DNPH柱按 DIN ISO 16000-3法測定（優(yōu)化前）
根據(jù)DIN ISO 16000-3的方法，僅能獲得11個(gè)色譜峰（見圖），丁烯醛-DNPH、2-丁酮-DNPH、甲基丙烯醛-DNPH、正丁醛-DNPH分離度不佳。
為了優(yōu)化加快方法優(yōu)化，本方案使用了色譜模擬軟件進(jìn)行快速的方法優(yōu)化。將所得的色譜圖輸入優(yōu)化軟件，軟件給出方法優(yōu)化建議，并根據(jù)軟件優(yōu)化結(jié)果建立新的分離方案。
圖色譜模擬軟件給出的方法操作設(shè)計(jì)區(qū)域
12紅尖測量條件
優(yōu)化后的方法如下：
流動(dòng)相：A：雙蒸水；B：乙腈
梯度：0~16min（60% A + 40% B）→ 30~40min（40% A + 60% B）→ 41min（60% A + 40% B）→ 45min（60% A +40% B）
流速：1ml/min
柱溫：22℃
進(jìn)樣體積：10µL
檢測波長：360nm
優(yōu)化后分離效果如圖所示。
13種羰基（醛酮）化合物的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖（優(yōu)化后）
表 13種羰基（醛酮）化合物保留時(shí)間表
|
序號(hào) |
化合物 |
保留時(shí)間 |
分離度 |
RSD% |
|
1 |
甲醛-DNPH |
7.47 |
- |
0.63 |
|
2 |
乙醛-DNPH |
10.92 |
8.78 |
0.65 |
|
3 |
丙酮-DNPH |
15.96 |
9.33 |
0.79 |
|
4 |
丙烯醛-DNPH |
17.63 |
2.69 |
0.47 |
|
5 |
丙醛-DNPH |
19.26 |
2.81 |
0.53 |
|
6 |
丁烯醛-DNPH |
23.08 |
8.17 |
0.17 |
|
7 |
2-丁酮-DNPH |
23.09 |
2.08 |
0.14 |
|
8 |
甲基丙烯醛-DNPH |
24.38 |
1.27 |
0.15 |
|
9 |
正丁醛-DNPH |
24.84 |
1.29 |
0.19 |
|
10 |
苯甲醛-DNPH |
27.94 |
9.30 |
0.12 |
|
11 |
戊醛-DNPH |
28.85 |
3.00 |
0.38 |
|
12 |
間甲基苯甲醛-DNPH |
30.81 |
6.66 |
0.10 |
|
13 |
己醛-DNPH |
32.14 |
4.35 |
0.18 |
關(guān)于 KNAUER AZURA HPLC plus
KNAUER AZURA HPLC plus系統(tǒng)是KNAUER新設(shè)計(jì)的高效液相色譜系統(tǒng)，采用模塊化的功能設(shè)計(jì)，可根據(jù)用戶需求，自由組合和定義HPLC的功能模塊，為操作人員帶來不一樣的分析體驗(yàn)。AZURA HPLC采用的泵單元P6.1L可為您提供等度、二元高壓、四元低壓三種不同梯度形成方式。每種類型的泵都可以支持5ml、10ml泵頭相互更換，使您在一套系統(tǒng)即可實(shí)現(xiàn)UHPLC、HPLC的轉(zhuǎn)換，為您提供一機(jī)多用的解決方案。
AZURA® 可為用戶提供190-700nm的UV/VIS和190-1000nm范圍的DAD檢測器，并針對(duì)不用的分析任務(wù)，設(shè)計(jì)了多種不同規(guī)格的流通池，如用于常規(guī)HPLC分析的耐壓流通池和高靈敏度檢測的光導(dǎo)流通池。
關(guān)于KNAUER科學(xué)設(shè)備有限公司
成立于1962年的德國KNAUER公司是歐洲HPLC技術(shù)的先驅(qū)，也是歐洲個(gè)HPLC生產(chǎn)廠家。創(chuàng)始人Herbert Knauer博士20世紀(jì)60年代初期就致力于HPLC和層析技術(shù)的研發(fā)，從溶劑輸送系統(tǒng)，檢測器技術(shù)到分離柱和填料，都有其貢獻(xiàn)。目前，德國KNAUER公司的HPLC產(chǎn)品和服務(wù)遍布全球60多個(gè)，以其專業(yè)的技術(shù)和誠信的服務(wù)在行業(yè)中享有盛譽(yù)。KNAUER是LUMTECH品牌OEM的主要工廠。綠綿科技是Knauer中國區(qū)分析液相/色譜柱總代理。
關(guān)于綠綿科技
北京綠綿科技有限公司(簡稱：綠綿科技)以體現(xiàn)客戶服務(wù)價(jià)值為宗旨，以專業(yè)精神和技能為廣大實(shí)驗(yàn)室分析工作者提供樣品前處理、樣品制備及分析、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)精確分析和管理的全面解決方案，致力于協(xié)助客戶提高分析檢測的效率和水平。主要代理產(chǎn)品聯(lián)系電話：010-82676061/2/3/4/5/6/7/8
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