如何在四極桿GC/MS上創(chuàng)建適用于NIST檢索的精確質(zhì)量譜庫
MassWorks的質(zhì)譜校準(zhǔn)技術(shù)已經(jīng)被證實能夠?qū)λ臉O桿GC/MS系統(tǒng)中的分子離子或碎片離子實現(xiàn)精確質(zhì)量數(shù)與元素組成測定。這一通常僅在高分辨率質(zhì)譜儀上才具備的能力，現(xiàn)可與NIST譜庫檢索相結(jié)合，以提高化合物鑒定的置信度。
本文我們將介紹通過MassWorks校準(zhǔn)技術(shù)在低分辨質(zhì)譜上創(chuàng)建“GC/MS精確質(zhì)量譜庫”的新方法。不同于當(dāng)前NIST譜庫僅對分子離子和碎片離子采用整數(shù)質(zhì)量精度的方式，這種新的譜庫方法將擴大對無分子離子的化合物的應(yīng)用范圍，還將通過添加所有碎片離子的精確質(zhì)量，增強對包含分子離子譜圖的譜庫檢索性能，以獲得更加準(zhǔn)確的結(jié)果。
精確質(zhì)量數(shù)據(jù)采集方法
圖1顯示了以安捷倫GC/MS為例的數(shù)據(jù)采集的設(shè)置方式，將GC/MS的采集方式選為輪廓（Profile）掃描模式，采樣閾值Threshold設(shè)置為0，然后采集樣品和PFTBA的數(shù)據(jù)。
在MassWorks軟件中打開PFTBA數(shù)據(jù)用于GC/MS精確質(zhì)量數(shù)校正，然后將其應(yīng)用于樣品譜圖，獲取GC/MS精確質(zhì)量譜圖。
圖1 安捷倫GC/MS數(shù)據(jù)采集的設(shè)置方式
創(chuàng)建“GC/MS精確質(zhì)量譜庫”
創(chuàng)建精確質(zhì)量GC/MS譜庫的包括三個主要步驟：①從MassWorks導(dǎo)出精確質(zhì)量譜圖至NIST MS Search、②對導(dǎo)出的譜圖進(jìn)行編輯，③保存精確質(zhì)量譜圖至譜庫。
1. 從MassWorks導(dǎo)出精確質(zhì)量譜圖
從MassWorks向NIST MS Search導(dǎo)出精確質(zhì)量譜圖的操作很簡單。只需在MassWorks的質(zhì)譜譜圖窗口中單擊右鍵，在彈出菜單（見圖2）中選擇“Library Search”，這時將執(zhí)行常規(guī)的NIST譜庫檢索，精確質(zhì)量譜圖將從MassWorks導(dǎo)出至NIST MS Search，如圖3所示，頂部的譜圖是從MassWorks導(dǎo)入的精確質(zhì)量譜圖，下方的譜圖則為NIST庫中原有的整數(shù)質(zhì)量譜圖。在圖3的左下方候選化合物列表窗口中選中正確的化合物，接著繼續(xù)下一步譜圖編輯操作。
圖2 從MassWorks軟件導(dǎo)出精確質(zhì)量譜圖至NIST MS Search
圖3 NIST MS search中選中正確的化合物
2. 編輯“精確質(zhì)量譜圖”
1） 復(fù)制NIST譜庫目標(biāo)化合物的所有質(zhì)譜圖信息——將圖3右下方“化合物信息”面板中復(fù)制并粘貼至一個txt格式的記事文本中，如圖4所示。
圖4 粘貼化合物信息至txt文本
2） 點擊“Librarian”和“Names”標(biāo)簽，打開“Spectrum Information”窗口。選中列表頂部的化合物譜圖，然后點擊“ed”工具欄按鈕（見圖5），使Spectrum Information窗口出現(xiàn)（見圖6）。
圖5 Librarian界面中選中精確質(zhì)量譜圖
3）從txt記事本中選擇性地復(fù)制信息并粘貼到“Spectrum Information”窗口，采用以下方式更新各字段內(nèi)容：
?、僬迟N化合物的“名稱”。
② 粘貼“CAS號”。
?、?輸入分子式和分子量。
④ 結(jié)構(gòu)式可由化合物的CAS號自動獲取，或者直接粘貼結(jié)構(gòu)圖
?、?在“other name”中粘貼化合物的其它名稱。
?、拊凇癈omments”中編寫定制消息。
?、唿c擊“Replace”（見圖6），更新該化合物譜圖的所有信息。
經(jīng)過編輯后，精確質(zhì)量譜圖現(xiàn)在擁有包括名稱、分子式、結(jié)構(gòu)等在內(nèi)的完整記錄，并在譜列表窗口頂部以更新后的名稱顯示。
圖6 為精確質(zhì)量譜圖添加化合物信息
3. 保存“精確質(zhì)量譜圖”至目標(biāo)譜庫
在保存精確質(zhì)量譜圖前，需要事先新建一個譜庫，如圖7所示，點擊“Create Library”按鈕，為將要創(chuàng)建的譜庫命名，例如“AM_nist”。
圖7 新建精確質(zhì)量譜庫
在圖6中，點擊“Add to library”按鈕，從彈出窗口（見圖8）中選擇已創(chuàng)建的庫，例如“AM_nist”，點擊“OK”完成。
圖8 選擇譜庫，將精確質(zhì)量譜圖添加至新的譜庫
成功創(chuàng)建精確質(zhì)量譜庫后，即可在MassWorks中對高質(zhì)量精度的GC/MS譜圖進(jìn)行化合物的精確檢索。在開始檢索之前，需要通過“Library Search Options”將已創(chuàng)建的精確質(zhì)量庫納入搜索范圍。在NIST MS Search的“Option”主菜單項中，選擇“Library Search Options”，點擊“Libraries”標(biāo)簽，選擇“am_nist”，然后點擊“ Add”添加精確質(zhì)量譜庫至檢索目標(biāo)庫（見圖9）。
圖9 選擇精確質(zhì)量譜庫用于檢索
精確質(zhì)量譜庫檢索
執(zhí)行精確質(zhì)量NIST庫檢索的操作與常規(guī)NIST庫檢索相同，如圖2所示，在測試譜圖中啟動NIST檢索，該譜圖的檢索結(jié)果如圖10所示。
圖10 精確質(zhì)量譜庫檢索結(jié)果
盡管該化合物在整數(shù)質(zhì)量譜庫和精確質(zhì)量譜庫中均有發(fā)現(xiàn)，但使用精確質(zhì)量譜庫時，所有離子的精確質(zhì)量匹配更接近實際測量值，精確質(zhì)量譜庫為檢索提供了更好的質(zhì)量準(zhǔn)確性匹配，因此檢索的匹配度比整數(shù)質(zhì)量譜庫更高，從而提高了鑒定結(jié)果的可靠性。
基于MassWorks校準(zhǔn)技術(shù)創(chuàng)建的精確質(zhì)量譜庫，可以顯著增強GC/MS系統(tǒng)的鑒定能力，無論是對存在明顯分子離子的化合物，或是對于那些不具備分子離子或存在同分異構(gòu)體混淆情況的化合物。結(jié)合NIST譜庫檢索，這種精確質(zhì)量譜庫方法有助于研究人員準(zhǔn)確、高效地鑒定復(fù)雜樣品中的化合物，無論是在環(huán)境監(jiān)測、風(fēng)味分析、食品安全檢測還是藥物代謝研究等領(lǐng)域，都有廣泛的應(yīng)用潛力。
關(guān)于MassWorks 軟件
MassWorks軟件是由 Cerno Bioscience 公司開發(fā)的一款革命性的MS數(shù)據(jù)定性分析軟件，能幫助我們在低分辨率的四極桿GC/MS、LC/MS直接測定化合物的精確質(zhì)量，并通過獨有的譜圖準(zhǔn)確度概念確定出準(zhǔn)確的分子式。MassWorks軟件同樣適用于高分率質(zhì)譜（TOF、Orbitrap）的定性分析。
關(guān)于綠綿科技
綠綿科技是Cerno Bioscience公司在中國區(qū)的總代理商，負(fù)責(zé)Cerno公司旗下的MassWorks、GC/ID 等產(chǎn)品市場推廣、銷售、售前/售后技術(shù)支持、應(yīng)用支持。
若您想了解獲取 MassWorks 產(chǎn)品的更多信息或應(yīng)用，歡迎致電綠綿科技！
關(guān)于綠綿科技
北京綠綿科技有限公司(簡稱：綠綿科技)以體現(xiàn)客戶服務(wù)價值為宗旨，以專業(yè)精神和技能為廣大實驗室分析工作者提供樣品前處理、樣品制備及分析、實驗數(shù)據(jù)精確分析和管理的全面解決方案，致力于協(xié)助客戶提高分析檢測的效率和水平。主要代理產(chǎn)品聯(lián)系電話：010-82676061/2/3/4/5/6/7/8
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